植物组织培养实验室常用仪器设备配置清单

Posted on 2021-09-14 11:11:20 by , 0

  组织细胞培养技术与其他一般实验室工作的主要区别在于要求保持无菌操作,避免微生物及其他有害因素的影响。其中动物细胞培养和植物细胞培养的环境要求也有所不同,今天为大家介绍植物组织培养实验室的常用仪器配置清单和实验室的基本操作。

  一、

  植物组织培养实验室的构成

  组织培养实验室布局的总体要求:便于隔离、便于操作、便于灭菌、便于观察

  完整的组织培养室通常包括洗涤室、准备室(化学实验室)、接种室(无菌操作室)、培养室、细胞学实验室等部分?梢愿菔导市枰吞跫猩杓啤

  但从功能上至少包括准备室(化学实验室)、接种室以及培养室三部分,并且按顺序排列。在准备室与接种室之间应留有缓冲空间(或建立缓冲室)。

  (一)准备室(化学实验室)

  1、主要功能

  用于培养器皿的清洗、干燥、培养基的配制、分装和灭菌、试管苗的出瓶及整理等工作。

  2、主要仪器设备及用品

  (1)药品柜、实验台、水槽

  (2)超声波清洗仪

  (3)凉干架

  (4)干燥箱

  (5)各种玻璃器皿(烧杯、量筒、容量瓶、试剂瓶、三角瓶等)

  (6)蒸馏水制造装置


  (7)天平(万分之一、百分之一)

  (8)移液器

  (9)pH计(不同范围pH试纸)

  (10)水浴锅

  (11)微波炉

  (12)电炉

  (13)磁力搅拌器

  (14)蠕动泵及培养基分装用品

  (15)高压灭菌锅


  (16)冰箱


  接种室(无菌操作室)

  1、功能

  接种材料的灭菌、接种以及培养物的继代转接等。

  接种室要求保持洁净,与化学实验室之间应设置缓冲室。

  2、主要仪器设备及用品

  (1)超净工作台

  (2)紫外灯

  (3)小推车

  (4)搁架

  (5)瓷盘

  (6)接种工具

  各种镊子、解剖刀、手术剪、普通剪刀、接种针、酒精灯、手持喷雾器、细菌过滤器等。

  (三)培养室

  1、功能

  主要用于植物材料的培养。

  要求室内洁净并能保持一定的温度、光照以及湿度,以促进植物材料的生长和分化。

  2、主要仪器设备及用品

  (1)培养架及灯管

  (2)摇床(振荡器)

  (3)空调

  (4)自动定时器

  (5)加湿及除湿器

  (6)光照培养箱

  (四)细胞学实验室

  1、功能

  主要用于培养材料的显微观察及照相等。

  2、主要仪式设备及用品

  体视显微镜、普通显微镜、倒置显微镜、荧光显微镜、配套显微照相装置、普通相机或数码相机、切片机及配套制片及染色用品等。

  体视显微镜用途:放大倍数5~80倍主要用于植物形态分化的观察、茎尖的切取。

  普通光学显微镜用途:用于植物切片观察,确定植物的发育进程,如:不定芽、不定胚的分化过程以及其它器官组织的分化等。

  倒置显微镜用途:主要用于细胞、原生质体的细胞分裂和细胞团形成的观察。

  二、

  实验室基本操作

  (一)洗涤

  1、普通器皿∶采用洗衣粉、洗洁精等中性洗涤剂洗涤。

  2、难清洗器皿及移液管等∶用水清洗后再用重铬酸钾洗液浸泡,最后清水冲洗,或用超声波仪清洗。

  (二)灭菌

  灭菌是指用物理和化学方法杀死物体表面和内部的所有微生物(包括芽胞),使之呈无菌状态。经过灭菌的物品称“无菌物品”。

  1、器具灭菌:培养皿、解剖刀、镊子等用品。

  (1)干热灭菌:铝箔包好后,放于恒温干燥箱内,150℃保温2小时,成本较高。

  (2)高压蒸汽灭菌:高压蒸汽灭菌锅内120℃15-20分钟。

  (3)灼烧灭菌:接种时,解剖刀及镊子等浸入95%乙醇,然后取出在酒精灯火焰上灼烧杀菌。

  2、培养基灭菌

  采用高压蒸汽灭菌。120℃15-20分钟。

  培养基体积越大,灭菌时间越长。

  3、不耐高温材料的灭菌

  采用过滤灭菌,如IAA、ZT、天然有机添加物等。

  4、外植体的表面灭菌

  (1)流水冲洗10-20分钟或更长时间

  (2)70-75%酒精中浸泡30秒

  (3)0.1%-0.2%氯化汞液中浸泡10分钟左右或在10%的次氯酸钠、饱和漂泊粉浸泡30分钟左右

  (4)蒸馏水冲洗4-5次

  (5)备用

  (三)无菌操作

  实验员消毒、实验室、无菌台灭菌→实验器材灭菌→无菌接种→消毒→实验台卫生→培养室培养

  1、消毒,更换实验服、帽子与鞋子,进入接种室。

  2、打开超净工作台和无菌操作室的紫外灯,照射40min左右,后关闭。

  3、开启过滤室风机,使无菌风吹拂工作台面和四周的台壁。

  4、用70%-75%的酒精擦拭工作台和双手。

  5、用沾有70%-75%的酒精的纱布擦拭盛培养基的培养器皿,放进工作台。

  6、把解剖刀、剪刀、镊子等器械浸泡在95%的酒精中,再在火焰上消毒,放在器械架上。

  7、在酒精灯火焰附近切割备用的接种材料。

  8、打开瓶口,用火焰烧瓶口,转动瓶口使瓶口部分都烧到。

  9、取下接种器械,在火焰上消毒。

  10、把培养材料放入培养瓶,盖上瓶口。

  11、接种结束后,清理和关闭超净工作台。

  注意:操作期间应经常用70%-75%的酒精擦拭工作台和双手,接种器械应反复在95%的酒精中浸泡和在火焰上消毒。

  以上设备清单仅供大家参考,具体配置需根据各位老师、使用者的实际需求策划。下次我们会为大家介绍动物组织培养实验室常用仪器清单及相关注意事项,希望的分享能对大家有所帮助。